原代細胞的分離培養：
原代培養即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內的狀態，表現出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結構、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養法有組織塊培養法和消化培養法。
（一）組織塊培養法
許多實驗室喜歡用組織塊培養法進行原代培養，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養皿或培養瓶后， 即可進行傳代。
1. 設備材料
培養箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養瓶、培養皿、消化液、基礎培養液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養皿內表面，吸去多余的培養液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養箱內。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養液少量，以使組織塊浸沒在培養液中。
（7）輕輕地將培養皿及組織塊移至CO2 培養箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養皿內表面，即可進行傳代培養。
甲魚外周血白細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | 甲魚外周血白細胞 | 組織來源 | 外周血 |
種屬 | 甲魚 | 生長特性 | 細胞為混合體系，大部分懸浮生長，小量貼壁生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心法獲得 | 英文名稱 | soft-shelled turtle Peripheral Blood leukocyte |
貨號 | EY-XY4105 | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細胞鑒定：血涂片，Giemsa染色驗證
支原體檢測：甲魚外周血白細胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
產品規格：5×105cells/T25或1mL凍存管
培養基：甲魚外周血白細胞專用培養基
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
細胞代數：第1代
產品貨期現貨，1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹：
白細胞(英文名:leukocyte，white blood cell，簡稱:WBC)，舊稱白血球。血液中的一類細胞。白細胞經復合染料染色后，可根據其形態差異和細胞質內有無的顆粒可分粒細胞和無粒細胞。無粒細胞又分為單核細胞與淋巴細胞兩種。血液中有三種類型的淋巴細胞：B細胞、T細胞和NK細胞。粒細胞胞質內含有嗜色顆粒，分為中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞。在顯微鏡下可以看到，血細胞中體積比較大、數量比較少。具有細胞核。 |
公司正在出售的產品：
小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 ，英文名： Slit2 ELISA Kit
人前心肽(Pro-ANP)ELISA檢測試劑盒HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 96T/48T
大鼠環加氧酶1(COX-1)免疫試劑盒 Rat Cyclooxygenase-1,COX-1 ELISA Kit
英文名稱Rat8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT大鼠8-異前列腺素F2α(8-ISOPGF2a)規格：96T/48T
裂解液Ⅷ細菌活性化蛋白制備
ELISAKitODC人鳥脫羧酶規格：48T/96T
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒
Humanclusterin,CLUELISAKit 人凝聚素(CLU)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor8-OHdG(Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine)ELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥苷規格：48T/96T
乙酸待測樣品處理試劑盒20次
Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒規格：96T/48T
甲魚外周血白細胞血紅素氧化酶 英文名稱： heme oxygenase-1 規格： 48T/96T 英文縮寫： HO-1
熱休克蛋白27 英文名稱： Heat shock protein 27 規格： 48T/96T 英文縮寫： HSP27
熱休克蛋白70 英文名稱： Heat shock protein 70 規格： 48T/96T 英文縮寫： HSP70
HA絲酸肽酶1 英文名稱： high temperature requireme A 規格： 48T/96T 英文縮寫： Ha 1
操作方法：
組織塊直接培養法（原代細胞培養實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數量的未分化的間質細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉移至一個小的無菌培養皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態下，將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環境中或置于37°C培養箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中，該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。
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