傳代培養操作步驟：
一、貼壁培養
細胞傳代培養操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養瓶內的培養液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據培養瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養瓶底。
（4）把培養瓶放入37℃ CO2培養箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養瓶中，補足培養液，搖勻，放置于37℃ CO2培養箱中進行培養。
（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。
NCI-H239人非小細胞肺癌細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | NCI-H239人非小細胞肺癌細胞（STR鑒定正確） | 組織來源 | 肺癌；非小細胞肺癌 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞代數 | 10代以內 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細胞詳細介紹：
細胞別稱 NCI-H239；人非小細胞肺癌細胞 背景介紹 NCI-H239細胞源于一位51歲患有非小細胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織，表達C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；該細胞攜帶K-ras 12突變；p53基因246位密碼子突變ATC→ATG；表達PDGF A和B鏈的異源mRNA；表達TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18陽性，波形蛋白陽性，神經絲蛋白陰性，脫氫酶陰性；據報道，在軟瓊脂中該細胞形成克隆的效率為9.7%。 細胞規格 1x106cells/T25或1mL凍存管 培養基 RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗 培養條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發貨方式復蘇發貨（免運輸費用）/ 凍存發貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用 特別說明以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主 |
二、懸浮細胞
傳代培養操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。
（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發生污染。
（2）所用培養液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養液。
（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。
（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。
（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。
（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。
公司正在出售的產品：
FJX1： 四連接同源蛋白FJX1抗體 CD24 Others Human 人 CD24 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0408NEC(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2 人組織因子(TF)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/AP 堿性0酸酶(AP)標記的羊抗雞IgG 0.1ml
G gamma3： G蛋白偶聯受體γ3抗體 hDPSCs, 人前磨牙牙髓干細胞 Human
HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 軟骨細胞培養基CM 人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)ELISA試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/HRP 辣根過氧化物酶標記的羊抗雞IgG 0.1ml
G gamma7： G蛋白偶聯受體γ7抗體 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21
RIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 SGC7901(胃腺癌細胞) 大鼠(FE)ELISA 試劑盒 Alpha1-MG 大鼠α1微球蛋白 96T
Mine adenosyltransferase： 蛋酸腺苷轉移酶抗體 人細胞;Hela S3 [HeLaS3]
LIF Protein Human 重組人 LIF 蛋白 (Fc 標簽) 大鼠調節轉錄肽(CA)ELISA試劑盒 Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) 小鼠膠原酶II 96T
phospho-MAPK11(Thr180+Tyr182)： 0酸化原活化的蛋白激酶p38β抗體 CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠腸靜脈內皮細胞培養基 100mL 大鼠調節激活正常T-細胞表達分泌因子(RAES)ELISA試劑盒 MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) 人巨噬細胞來源的趨化因子 96T
NCI-H239人非小細胞肺癌細胞CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽) 人白細胞調節素(LR)ELISA 試劑盒 MLH1(Mutl homolog l gene) 錯配修復蛋白1抗原 0.5mg
ILT2/CD85j： 細胞表面樣轉錄因子2抗體 PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人肝內膽管上皮細胞培養基 100mL 人白細胞介素4受體(IL-4R)ELISA試劑盒 MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原 0.5mg
Integrin alpha 2/CD49b： 整合素α2抗體 非洲綠猴腎細胞系/IgR;VERO/IgR 大鼠肝癌細胞，CBRH-7919細胞 BEL-7405(肝癌細胞)
LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 人白細胞介素25(IL-25)ELISA試劑盒 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受體1B抗原 0.5mg
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